伊紅染色液
Eosin Staining Solution
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產(chǎn)品組成：
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組分貨號(hào)
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名稱
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規(guī)格
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貯存
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EO1016S
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伊紅染色液
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100
ml
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RT 避光
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說(shuō)明書(shū)
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一份
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● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
伊紅(Eosin)是一種化學(xué)合成的酸性染料，在水中解離成帶負(fù)電荷的陰離子，可以和蛋白質(zhì)氨基上帶正電荷的陽(yáng)離子結(jié)合，可以使細(xì)胞胞漿染成不同程度的紅色或粉紅色，而蘇木素染色液能將細(xì)胞核染成藍(lán)色，與紅色胞漿形成鮮明對(duì)比，從而使蘇木素伊紅(HE)染色成為病理組織切片中最廣泛使用的一種常規(guī)染色方法。
本染色液可以重復(fù)使用，直至認(rèn)為效果不佳時(shí)再換用新的染色液。一個(gè)包裝的本染色液至少可以染色200個(gè)樣品。
● 貯存：
RT避光保存，一年有效。
● 操作步驟：
1. 需要用戶自己準(zhǔn)備的試劑
a. 固定液： 4%多聚甲醛固定液。
b. 分化液(5%的乙酸溶液或0.5%的鹽酸乙醇)；
c. 如果需要脫水、透明和封片處理，還需自備二甲苯，和封片劑及80%乙醇、90%乙醇、無(wú)水乙醇；
d. 70%乙醇。
2. 樣品處理
a. 對(duì)于石蠟切片：
二甲苯中脫蠟5-10分鐘。
換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘。
無(wú)水乙醇5分鐘。
90%乙醇2分鐘。
80%乙醇2分鐘。
70%乙醇2分鐘。
蒸餾水2分鐘。
b. 對(duì)于冰凍切片：
固定液固定10分鐘以上。
蒸餾水2分鐘。
c. 對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞：
固定液固定10分鐘以上。
蒸餾水洗滌2分鐘。
換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。
3. 伊紅染色
對(duì)于上述處理好的樣品：
伊紅染色液染色30秒-2分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。 此時(shí)，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。
注：如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染，可以參考上述步驟在其它染色完成后直接進(jìn)行伊紅染色。
4. 脫水、透明、封片或進(jìn)行其它染色
a. 脫水、透明、封片：
70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，無(wú)水乙醇10秒。二甲苯透明5分鐘。
換用新鮮的二甲苯，再透明5分鐘。
用中性樹(shù)膠或其它封片劑封片。
顯微鏡下觀察，細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。
b. 進(jìn)行其它染色：
如果進(jìn)行免疫熒光染色，或進(jìn)行Hoechst等熒光染料的染色，在伊紅染色液染色后： 70%乙醇洗滌2次，每次2分鐘。 PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘。 然后就可以進(jìn)行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色了。如果免疫熒光染色效果不佳，可能染料對(duì)抗體結(jié)合有影響，請(qǐng)單獨(dú)染色。