Anti-COX
IV抗體（鼠單抗）
Anti-COX IV Antibody（Monoclonal Antibody from Mouse）
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產(chǎn)品編號(hào)
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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RGC2030
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Anti-COX IV抗體（鼠單抗）
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20 μl
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● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
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來(lái)源
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用途及稀釋比例
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抗體類型
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COX IV分子量
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Mouse
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WB 1:5000-10000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
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單克隆抗體
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~17 kD
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注：WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF,
Immunofluorescence
COX IV抗體用經(jīng)過(guò)適當(dāng)修飾的人工合成COX IV一段多肽作為抗原制備而成的抗COX IV小鼠單克隆抗體。本抗體在Western blot或免疫染色時(shí)僅識(shí)別COX IV。COX IV抗體可用作線粒體蛋白上樣量的內(nèi)參。
真核細(xì)胞中的細(xì)胞色素C氧化酶(Cytochrome C Oxidase，簡(jiǎn)稱COX)是一種異源寡聚酶，通常含有13個(gè)亞基，定位于線粒體內(nèi)膜，是線粒體呼吸鏈的酶復(fù)合物，它可以從每4個(gè)還原性的細(xì)胞色素C得到一個(gè)電子，傳遞給一個(gè)氧分子，最終把一個(gè)氧分子轉(zhuǎn)變成兩個(gè)水分子。在此過(guò)程中細(xì)胞色素C氧化酶會(huì)結(jié)合4個(gè)質(zhì)子用于產(chǎn)生2個(gè)水分子，同時(shí)把4個(gè)質(zhì)子轉(zhuǎn)移到膜的另外一側(cè)產(chǎn)生質(zhì)子梯度，即建立跨膜的電化學(xué)勢(shì)，隨后ATP合成酶可以利于該電化學(xué)勢(shì)合成ATP。細(xì)胞色素C氧化酶中構(gòu)成催化中心的3個(gè)最大的亞基由線粒體DNA編碼，其余10個(gè)亞基包括COX IV由細(xì)胞核內(nèi)的基因組DNA編碼。細(xì)胞色素C氧化酶活性缺陷和人類多種疾病相關(guān)。
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測(cè)，至少可以檢測(cè)20次。
● 貯存形式：
1 mg/ml抗體溶于PBS，50%甘油，pH7.2。
● 保存及運(yùn)輸條件：
-20℃保存，一年有效；避免反復(fù)凍融；濕冰運(yùn)輸。
● 使用說(shuō)明：
1. Western Blot雜交(ECL顯色)：1:1000-5000稀釋，常溫孵育1-2 h或4℃過(guò)夜。
2. 免疫熒光（IF）和免疫組化（IHC）：1:200-1000稀釋。
● 實(shí)驗(yàn)示例：
K562懸浮細(xì)胞膜蛋白檢測(cè)
樣品：TP為RIPA提取總蛋白做對(duì)照；CY為膜蛋白提取上清-胞漿蛋白；M為使用不同去垢劑提取的膜蛋白
電泳：4-18% RealPAGE PrecastGel，樣品使用5×速溶性上樣緩沖液配成0.5μg/μl，37度30min后上樣，上樣體積為10μl和20μl，
轉(zhuǎn)膜：0.45μm PVDF膜，1×RealBlot濕轉(zhuǎn) 400mA 35min。
封閉：快速封閉液 RT 10 min
一抗：ATPase兔單抗 1:5000 O/N；
GAPDH兔多抗 1:3000 O/N；
COX
IV鼠單抗 1:5000
O/N。
二抗：羊抗鼠IgG-HRP（貨號(hào)：HGM1060） 1:5000 RT
60min；羊抗兔IgG-HRP（貨號(hào)：HGM1020） 1:5000 RT 60min；
檢測(cè)：RealECL發(fā)光液（貨號(hào)：EC2520）自動(dòng)曝光1秒
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