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細(xì)菌蛋白提取試劑盒

細(xì)菌蛋白提取試劑盒

產(chǎn)品編號(hào):RTD8101

產(chǎn)品規(guī)格:100次

數(shù)量
價(jià)格 ¥400


細(xì)菌蛋白提取試劑盒(100次)  貨號(hào):RTD8101

產(chǎn)品組份及規(guī)格

產(chǎn)品編號(hào)

名稱

規(guī)格

貯存

運(yùn)輸

RTD8101-01

細(xì)菌蛋白提取緩沖液

100 ml

4

常溫

PM1790

100 mM PMSF100×

10 ml

RT

(配制后-20℃

常溫

RTD8101-03

溶菌酶(50mg/ml

1 ml

-20℃

濕冰

RTD8101-04

DNase I1000U/ml

100 μl

-20℃

濕冰

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

細(xì)菌蛋白提取試劑盒使用溫和的非離子型去污劑,適用于大腸桿菌表達(dá)的重組蛋白提取。提取過程中不需進(jìn)行超聲破碎等復(fù)雜的操作步驟,有效避免了外源蛋白的污染。該試劑盒在抽提試劑的基礎(chǔ)上添加了溶菌酶、DNaseⅠ和蛋白酶抑制劑PMSF,可提高蛋白提取效率并減輕因DNA引起的粘稠現(xiàn)象,有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物學(xué)活性,可進(jìn)行IP、Western blot實(shí)驗(yàn);提取體系中不含EDTA,可直接通過Ni-NTA 等純化填料進(jìn)行蛋白純化。該試劑盒既可適用于小量蛋白表達(dá)檢測(cè),也適用于大量蛋白的表達(dá)純化試驗(yàn)。

每次提取使用1ml 緩沖液計(jì)算,該試劑盒可以使用100次。

●    貯存條件:

試劑組份按照溫度貯存,可保存 12個(gè)月。

●    使用方法:

1. 8,000 rpm常溫離心 3 min 后,棄上清,盡量棄除殘余培養(yǎng)基,留取管底部菌體。

2. 即用型提取緩沖液配制:每ml 提取緩沖液中加入10 μl PMSF,10 μl 溶菌酶,1 μl DNase I,混勻后4℃貯存?zhèn)溆谩?b>注:該緩沖液現(xiàn)用現(xiàn)配,不建議貯存。

3. 按照原菌液1/2-1/5體積加入即用型提取緩沖液,即2-5 ml菌液收集的菌體加入1 ml 提取緩沖液,用吸頭吹打至無可見細(xì)胞團(tuán)塊,重懸菌體。

4. 20-37孵育 15-20 min,期間輕彈離心管數(shù)次以加速裂解。

注:若蛋白表達(dá)量較低,建議結(jié)合超聲破碎,置冰上后,采用300w,10s 超聲/10s 間隔,超聲20min,至菌液變清亮。

5. 裂解完成后 13,000rpm4℃離心5 min,將上清(上清中即為可溶性蛋白)轉(zhuǎn)移至新的離心管中,直接進(jìn)行下一步純化或檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。

6. 蛋白提取物分裝后建議-80℃保存。

實(shí)驗(yàn)示例:


 
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