RNAwait使用說明
樣品保存液
● 產(chǎn)品編號(hào)及規(guī)格：
RTR2305 100ml 200元
● 產(chǎn)品簡介：
RNA高效保存液（RNAwait）是一種無毒的可直接使用的樣品儲(chǔ)存液，能使細(xì)胞內(nèi)的RNA與RNA酶分離，可以快速可靠地保存動(dòng)物組織、細(xì)胞內(nèi)的RNA。組織獲取后立即浸入RNAwait保存液中，在室溫可以保存7天，4℃可以保存4周，-20℃、-80℃標(biāo)本可以長期保存，RNA穩(wěn)定存在不降解，取出后用各類方法抽提可以獲得高質(zhì)量的RNA。
● 保存條件：
15–25°C，保質(zhì)期2年。低溫條件下有結(jié)晶析出時(shí)加熱至37°C溶解后使用。
● 操作流程：
1．根據(jù)要保存的各樣本的體積，計(jì)算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應(yīng)當(dāng)是組織體積的10倍（100mg組織約用1ml RNAwait）；離心收集2×107細(xì)胞RNAwait的用量是1ml。加入RNAwait的原則是：量寧多勿少。
建議在實(shí)際操作中不要稱量組織，而直接根據(jù)目測(cè)結(jié)果加入RNAwait量，以加快操作和減少污染。例如5mm邊長的立方體組織塊，體積為125mm3=125μl，故應(yīng)當(dāng)加入1.25ml的RNAwait液。
2．將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中；
3． 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀，較小的組織直接取下，立即完全浸入RNAwait中。
注：組織的厚度一定要<0.5
cm。組織過厚則RNAwait不能有效滲入，組織中間部位的RNA不能受到保護(hù)。較大的組織可以切成厚度<0.5 cm的任意片狀后保存，較小的組織（如大鼠的腎臟、脾臟，小鼠的大部分器官）則可以直接浸入RNAwait。
4．保存時(shí)先將樣本浸入RNAwait后置4℃冰箱過夜（注：4℃過夜是必需的，這樣可使RNAwait完全滲入到組織中），然后轉(zhuǎn)移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃時(shí)可能為液態(tài)，也可能為固態(tài)，如有結(jié)晶析出，也是正常情況）；或者在4℃冰箱過夜后，直接轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的標(biāo)本，反復(fù)凍融至室溫20次不影響RNA的質(zhì)量。
● 注意事項(xiàng)：
1. 組織和細(xì)胞取材速度要快，在獲取后應(yīng)當(dāng)盡快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2. 冰凍組織不能用RNAwait保存，因?yàn)镽NAwait不能有效滲入冰凍組織。
3．保存樣品的RNA提取：樣本從-20℃或-80℃冰箱取出后，復(fù)溫到室溫后，取出組織塊，再用于提取RNA。細(xì)胞樣本則復(fù)溫后低速離心收集細(xì)胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后繼的處理（如組織勻漿）可以在室溫下進(jìn)行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保護(hù)。殘留少量RNAwait保存液不影響后繼提取RNA的質(zhì)量。
4. RNAwait在動(dòng)物組織（如大鼠肝臟，脾臟）和細(xì)胞（如DH5α）RNA的保護(hù)中效果不錯(cuò)；植物材料種類繁多，沒能一一測(cè)試(煙草和擬南芥葉片中的RNA能被RNAwait有效保護(hù))，建議預(yù)實(shí)驗(yàn)后再使用，